Isolierung und Charakterisierung eines neuen Plazenta-Gewebsproteins (PP11)

1432-0711

Placenta specific protein PP11 ; Isolation ; Physical and chemical characterization ; Immunochemical determination ; Plazentaspezifisches Protein PP11 ; Isolierung ; physikalische und chemische Charakterisierung ; immunchemische Bestimmung

Springer Online Journal Archives 1860-2000

Medicine

Zusammenfassung Beschrieben wird die Isolierung und Charakterisierung eines neuen Plazenta-Gewebsproteins (PP11) aus dem Extrakt reifer menschlicher Plazenten. Die Reinigung dieses Proteins erfolgte durch fraktionierte Fällung der Proteine mit Rivanol und Ammoniumsulfat sowie unter Verwendung der Gelfiltration und Ionenaustauschchromatographie und mit Hilfe von Immunadsorbentien. PP11 ist ein Glykoprotein und hat einen Kohlenhydratgehalt von 3,9% (Hexosen 2,6%, Hexosamine 1,0%, Fucose 0,05% und Neuraminsaure 0,26%). Auch die Aminosäurenzusammensetzung dieses Proteins wird mitgeteilt. PP11 hat die elektrophoretische Beweglichkeit eines α1-Globulins und einen Sedimentationskoeffizient von 3,5 S. In der Ultrazentrifuge wurde für das neue Protein ein Molekulargewicht von 44 300, im SDS-haltigen Polyacrylamidgel dagegen ein Molekulargewicht von 62 000 ermittelt. Der isoelektrische Punkt von PP11 liegt bei pH 5,1–5,2. Nachweis und Bestimmung von PP11 erfolgten mit immunologischen Methoden. Aus einer ausgewachsenen menschlichen Plazenta lassen sich im Durchschnitt 11 mg PP11 extrahieren. Im Extrakt anderer menschlicher Organe konnte das neue Protein nicht nachgewiesen werden; PP11 scheint demnach spezifisch für die Plazenta zu sein. In Seren und im Fruchtwasser kommt PP11 nicht oder nur in Spuren (〈 0,1 mg/100 ml) vor. Plazenten von Affen enthalten Proteine, die mit menschlichem PP11 immunchemisch identisch sind.

Summary The isolation and characterization of a new placental protein (PP11) are described. The protein was purified from extracts of human term placentae by rivanol and ammonium sulfate fractionation, gel filtration, ion exchange chromatography, and by use of immunosorbents. PP11 is a glycoprotein which contains 3.9% carbohydrates (hexoses 2.6%, hexosamines 1.0%, fucose 0.05%, and sialic acid 0.26%). The amino acid composition of this protein was also determined. PP11 was found to have a sedimentation coefficient of 3.5 S, a molecular weight of 44,300 as determined in the ultracentrifuge and a molecular weight of 62,000 as determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. PP11 has the electrophoretic mobility of an α1 globulin and an isoelectric point at pH 5.1–5.2. For the detection and quantitation of PP11 immunochemical methods were used. From one human term placenta an average amount of 11 mg PP11 can be extracted. In extracts from other human tissues this protein could not be detected; it, therefore, appears to be specific to the placenta. PP11 was undetectable or present only in trace amounts (〈 0.1 mg/100 ml) in maternal and cord blood serum and in amniotic fluid. Placentae from monkeys contained proteins immunochemically identical to PP11.

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